Citrus Research & Technology
https://citrusrt.ccsm.br/article/doi/10.4322/crt.ICC043
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Note

A co-inoculation technique to rapidly screen citrus hybrids for resistance to both Alternaria Brown Spot caused by Alternaria alternata and Citrus Scab caused by Elsinoë fawcettii  

Técnica de co-inoculação para rastrear rapidamente híbridos de citros para resistência a mancha marrom alternária e verrugose dos citros 

Malcolm Wesley Smith, Debra Lorraine Gultzow, Toni Karen Newman, Sigrid Carola Parfitt & Andrew Keith Miles

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Abstract

A simple and inexpensive technique has been developed to allow the simultaneous screening of young hybrid seedlings for susceptibility to Alternaria Brown Spot (ABS) caused by Alternaria alternata and Citrus Scab (CS) caused by Elsinoë fawcettii. It is employed within six months of seed sowing, prior to hybrids being field planted, and has significantly improved breeding efficiency. By using the same culture techniques to multiply each pathogen, greater flexibility and ease of inoculation has been achieved. Plates of each pathogen are scraped/macerated to remove spores and other colony-forming units, strained through a coarse filter, combined and immediately sprayed onto vigorously growing seedlings. These seedlings are then incubated at ~25°C and high humidity for 4-7 days before being returned to the greenhouse. Hybrids susceptible to ABS develop symptoms within two weeks and are immediately discarded. A second round of culling is performed after four weeks when CS symptoms have expressed. The process is repeated three times to minimise ‘disease escapes’ and has virtually eliminated these diseases from our field plantings of new hybrids. Nucellar seedlings of genotypes known to be resistant and/or susceptible to each pathogen were used to confirm that mixing the two pathogens did not cause a change in symptom development for either disease.
 

Keywords

breeding, genetic resistance, pathogen, fungal diseases.

Resumo

Uma técnica simples e barata foi desenvolvida para permitir a rastreabilidade simultânea de mudas híbridas jovens de citros quanto à suscetibilidade a mancha marrom de alternária (MMA) causada por Alternaria alternata e verrugose dos citros causada por Elsinoë fawcettii. O teste foi realizado seis meses após a semeadura de sementes, antes dos híbridos serem plantados no campo e melhoraram significativamente a eficiência de reprodução. Ao utilizar as mesmas técnicas de cultura para multiplicar cada patógeno, conseguiu-se maior flexibilidade e facilidade de inoculação. As placas de cada patógeno são raspadas e maceradas para remover esporos e outras unidades formadoras de colônias, filtradas com um filtro, misturadas e imediatamente pulverizadas em mudas com crescimento vigoroso. Estas mudas são então incubadas a ~ 25 °C e alta umidade durante 4-7 dias antes de serem devolvidas à estufa. Os híbridos suscetíveis a MMA desenvolvem sintomas dentro de duas semanas e são imediatamente descartados. Uma segunda rodada de descarte é realizada após quatro semanas, quando os sintomas da verrugose se manifestam. O processo é repetido três vezes para minimizar “escapes das doenças” e praticamente eliminou essas doenças das coleções de campo de novos híbridos. As mudas nucelares de genótipos conhecidos como resistentes e/ou suscetíveis, a cada patógeno, foram utilizadas para confirmar que a mistura dos dois agentes patogênicos não causou alteração no desenvolvimento de sintomas das doenças testadas.

Palavras-chave

melhoramento, resistência genética, patógeno, doenças fúngicas.
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